JNNP： 细胞检测在血清阴性重症肌无力表征中的临床价值

重症肌无力（MG）是神经肌肉接头（NMJ）最常见的疾病，由自身抗体引起，这种抗体会损害神经肌肉传递，并导致自愿性肌肉疲劳无力。MG抗体针对NMJ的不同蛋白质，并与不同的疾病亚型相关。标准乙酰胆碱受体（AChR）放射免疫沉淀分析（RIA）可检测约80%-85%的全身性MG患者和高达65%的眼部MG患者的抗体，特异性为97%-99%。在AChR阴性MG中寻找其他抗体导致在多达40%的AChR阴性患者中鉴定出肌肉特异性激酶抗体，目前在大多数实验室通过RIA检测到。最近，在不同比例的MG患者中描述了抗低密度脂蛋白受体相关蛋白（LRP4）的抗体，使用不同的测定方法，特异性较低、在过去十年中，利用人类胚胎肾（HEK）293个T细胞设计以表达特定抗原的高灵敏度活细胞检测法（l-CBA）的发展导致了“聚集性AChR抗体”的检测。

这提高了血清明显阴性MG（SNMG）患者的诊断率，尤其是在儿科和眼科病例中。然而，迄今为止，已发表的研究没有量化l-CBA对SNMG诊断的贡献程度，也没有询问是否有新的检测方法可以通过单一检测捕获许多抗原特异性。以前的报告通常基于相对较小的SNMG队列，重点是仅检测聚集的AChR抗体，并且仅涉及全身或眼部症状。本研究在一个三级中心研究了连续23年的MG患者队列，以通过l-CBAs评估聚集性AChR（胎儿或成人型）、肌肉特异性激酶抗体和LRP4抗体的存在和临床意义，并开发了一种新的CBA方法。本文发表在《神经病学，神经外科学和精神病学杂志》上（Journal of Neurology, Neurosurgery & Psychiatry）。

每个SNMG患者以及50名健康对照和60名疾病对照的最早血清样本（水通道蛋白阳性视神经脊髓炎，多发性硬化，免疫介导的周围神经病变，肌萎缩侧索硬化，肌病）通过l-CBAs研究。用l-CBAs检测82例SNMG患者的血清。转染人胚肾细胞以单独表达聚集的AChR、MuSK或LRP4；或转染以联合表达成簇的AChR和MuSK。采用放射免疫分析法（RIA）检测AChR或肌肉特异性激酶抗体阳性的30例和20例患者的血清作为对照。

82例SNMG患者中53例（72%）为全身性，29例（28%）为眼部疾病。聚集的AChR-CBA检测到82例患者中的16例（19.5%；包括4例仅具有胎儿AChR抗体的患者），而82例患者（8.5%）中的7例具有肌肉特异性激酶抗体。 未发现LRP4抗体。总的来说，具有聚集性AChR抗体、CBA阳性肌肉特异性激酶抗体MG或三重血清阴性的SNMG患者比RIA阳性MG患者更年轻，病情较轻，并且在发病后不久开始免疫治疗时具有更好的临床结果，尽管与RIA阳性MG患者相比，从发病到免疫治疗的时间间隔没有差异。

SNMG队列的临床特征和基于细胞的分析（CBA）结果

尽管在MG抗体检测方面取得了进展，但约10%的患者对AChR或肌肉特异性激酶抗体的放射免疫分析仍呈阴性。在这里，我们发现三分之一的RIA阴性患者，无论是全身性MG还是眼部MG，都对聚集的成人/胎儿AChR或肌肉特异性激酶抗体呈阳性。此外，使用l-CBA成功地区分了胎儿或成人AChR的抗体特异性，9名患者仅携带针对成人AChR亚型的抗体，4名患者（主要是OMG）仅携带针对胎儿AChR的血清。患者的新生儿均无新生儿MG病史。事实上，优先结合胎儿或成人AChR亚型的MG抗体是罕见的，但可能与临床表型有关。这是否与眼外肌中胎儿ACHR的已知表达一致值得进一步研究。

单个和组合成人AChR/肌肉特异性激酶抗体分析结果

人群中缺乏LRP4抗体并不完全出乎意料。在来自不同国家的SNMG研究中，LRP4抗体的发病率普遍较低且不稳定。此外，ALS患者中报告的可变发病率（希腊/意大利患者为23%，美国患者为10%，中国患者为5%）可能反映出需要改进检测特异性。值得注意的是，在包括15例ALS患者在内的任何疾病对照组中均未检测到LRP4抗体，正如先前意大利多中心研究所报告的，在该研究中发现14%的MG患者具有LRP4抗原。

约三分之一的SNMG患者通过l-CBA检测到AChR或肌肉特异性激酶抗体，并通过组合l-CBA有效检测到。在这一大型未经选择的MG患者队列中的结果证明了进行CBA的诊断有用性以及使这些测试更广泛可用的重要性。