J Hepatol:用液滴数字PCR检测anti-HBc阳性患者肝组织内HBV cccDNA水平

2018-07-24 MedSci MedSci原创

研究表明,采用内部液滴数字PCR (ddPCR)检测方法,大约一半的OBI病例中可以检测到肝内HBV cccDNA。anti-HBc IgG的效价可能是预测免疫抑制患者OBI重新激活的有效指标。

研究背景:对隐匿性乙型肝炎病毒(HBV)感染(OBI)者的准确诊断,需要检测乙肝表面抗原阴性个体肝组织中的HBV DNA。然而,在临床实践中,研究发现乙肝核心抗体阳性的患者,潜在OBI的机会较高。本研究在anti-HBc阳性的患者中,调查了OBI真实的患病率和肝脏内HBV的分子特征。

研究方法:通过标准的血清学筛查,100例器官移植捐赠者的肝脏内(平均年龄68.2岁;在标准血清学检测中,有64名男性,36名女性)的anti-HBc为阳性,通过巢式PCR检测总HBV DNA,用内部液滴数字PCR (ddPCR)检测HBV共价闭合环状DNA (HBV cccDNA)(线性度:R2=0.9998; 细胞定量检测下限分别为2.4和0.8拷贝/10(5))。

研究结果:研究中总共有52%(52/100)的个体被发现存在OBI。在OBI阳性的个体中,27例患者存在cccDNA,cccDNA中位水平为13copies/105细胞 (95% CI: 5-25)。采用特异性方法检测IgG类的anti-HBc,HBV ccc DNA阳性供者的中位抗体水平明显高于HBV ccc DNA阴性供者的抗体水平(临界值指数[COI]分别为17.0 [7.0-39.2] 和5.7 [3.6-9.7], p=0.007)。多元分析表明,临界值指数高于4.4时,anti-HBc IgG效价与肝内HBV cccDNA相关(优势比:8.516, p=0.009);较低的anti-HBc IgG预测值,能够排除HBV cccDNA存在的可能,其阴性预测值为94.6%。

研究结论:研究表明,采用内部液滴数字PCR (ddPCR)检测方法,大约一半的OBI病例中可以检测到肝内HBV cccDNA。anti-HBc IgG的效价可能是预测免疫抑制患者OBI重新激活的有效指标。

原始出处:

Caviglia GP, Abate ML, Tandoi F, et al. Quantitation of HBV cccDNA in anti-HBc-positive liver donors by droplet digital PCR: A new tool to detect occult infection. J Hepatol, 2018, 69(2), 301-307.

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