Lupus Sci Med：循环中性粒细胞胞外陷阱残留物作为预测狼疮性肾炎预后的生物标志物

狼疮性肾炎(LN)可影响多达65%的系统性红斑狼疮(SLE)患者，其特征是对治疗的反应存在显著差异。考虑到治疗反应的延迟与肾损害风险的增加有关，在LN耀斑开始时预测治疗反应的能力可以帮助定制治疗，潜在地改善肾脏预后。与健康对照(HC)的中性粒细胞相比，SLE患者的中性粒细胞经历netois5的能力增加:netois5是中性粒细胞死亡的一种特殊形式，最终形成中性粒细胞胞外陷阱(NETs)，其由包裹有细胞质和核蛋白的染色质原纤维组成。血清中NET残留物或NET形成替代物(游离DNA和中性粒细胞特异性蛋白)的增加与LN的存在相关。在增生性LN肾活检中也发现了嗜中性粒细胞，将NETs与LN联系起来。

与HC中性粒细胞相比，SLE中性粒细胞特征性地释放更多的高迁移率组盒1 (HMGB1)蛋白。一旦进入细胞外空间，HMGB1就会作为一种警报蛋白，激活与LN发病相关的多种炎症细胞。外周血和尿液HMGB1水平已被证明与ln活性相关。此外，我们已经证明NETs是细胞外HMGB1的来源，并且SLE NETs中HMGB1的量与ln的严重程度相关。 Elastase是一种中性粒细胞特异性蛋白，负责NETs中大部分的蛋白水解活性，也被证明会损害肾内皮细胞，导致肾功能障碍和蛋白尿。综上所述，这些发现表明，NET特异性成分，包括Elastase和HMGB1，可能是肾脏炎症和损伤的原因，这可能反过来决定了疾病的严重程度和对治疗的反应。本研究的目的是确定LN发作时血清中NET残余物(特别是Elastase- DNA和HMGB1- DNA复合物)的数量是否能预测接下来24个月的肾脏预后。

方法：采用前瞻性随访队列进行回顾性研究。该研究包括两个队列:一个探索性队列评估NET残余水平与活动性LN存在之间的关系，另一个单独的LN队列确定NET残余在随后24个月预测肾脏预后的效用。

表1 探索性队列和LN队列患者的基线人口学和临床特征

图1 SLE和HC患者的NET残留水平。(A)活动性SLE (n=49)、非活动性SLE (n=23)和HC (n=20)之间NET残余水平的比较;(B)根据有无活动性LN (n=31)对活动性SLE患者进行分层;(C)探索性队列中增生性LN (n=7)和非增生性LN (n=6)。(D)探索性队列中Elastase- DNA和HMGB1- DNA水平的相关性。(E)在LN队列中，增生性LN (n=62)和非增生性LN (n=23)之间NET残余水平的比较。对于所有图形，符号表示单个个体的决定，列表示中位数，条形为IQR。所有组间比较的p值均显示出来，并按方法中概述的方法计算。HC，健康控制;LN，狼疮肾炎;NET，中性粒细胞胞外陷阱。

表2 LN发作后24个月肾脏预后的预测因素(LN队列，N=109)

表3肾病发作后24个月肾脏预后的预测因素。排除LN发作时eGFR<60的患者(N=89)

图2 LN耀斑24个月后NET残留量与肾功能下降的线性关系。根据种族、治疗依从性、发作时的血清肌酐、既往LN发作史、采集样本前3个月内接受的免疫抑制治疗以及采集样本到NET残留物量化的月间时间对回归分析进行调整。eGFR，估计肾小球滤过率;LN，狼疮肾炎;NET，中性粒细胞胞外陷阱。

结果：探索性队列共纳入92例，其中活动性系统性红斑狼疮(SLE) 49例，非活动性SLE 23例，健康对照(HC) 20例。SLE患者的NET残留物水平显著高于HC患者(两种复合物均p<0.0001)，活动性LN患者(36%)的NET残留物水平显著高于无LN的活动性SLE (Elastase- DNA: p=0.03;HMGB1- DNA: p=0.02)。LN队列包括109名活动性LN患者。增生性LN患者的NET残余水平明显高于非增生性LN (Elastase- DNA: p<0.0001;HMGB1- DNA: p=0.0003)。基线NET残留水平较高的患者未达到完全缓解的几率更高(Elastase- DNA: OR 2.34, p=0.007;HMGB1- DNA: OR 2.61, p=0.009)和进展为严重肾损害的患者(Elastase- DNA: OR 2.84, p=0.006;HMGB1- DNA: OR 2.04, p=0.02)。

结论：Elastase- DNA和HMGB1- DNA复合物可预测肾脏预后，提示它们可用于识别在发作时需要更积极治疗的患者。

文献来源：Whittall-Garcia LP,  Naderinabi F,  Gladman DD,Circulating neutrophil extracellular trap remnants as a biomarker to predict outcomes in lupus nephritis.Lupus Sci Med 2024 Jan 04;11(1)