SCIENCE：反应最快的CRISPR基因编辑技术了解下？
2020-06-16 MedSci原创 MedSci原创
最近，来自霍普金斯医学院的研究人员开发了一种笼式RNA策略，其允许Cas9与DNA结合，但在光诱导激活之前不会裂解。
CRISPR-Cas系统为基因组编辑提供了多功能工具。
最近，来自霍普金斯医学院的研究人员开发了一种笼式RNA策略，其允许Cas9与DNA结合，但在光诱导激活之前不会裂解。这种方法被称为非常快速的CRISPR技术（vfCRISPR），其在亚微米和第二尺度创建双链断裂（DSBs）。同步裂解改善了DNA修复的动力学分析，揭示了细胞在几分钟内对Cas9诱导的DSB作出反应，并可以在DNA连接后保留MRE11。
DNA损伤后H2AX的磷酸化每分钟传播超过10万碱基，达到3000万碱基。
利用单细胞荧光成像，研究人员表征了53BP1修复灶形成和溶解的多个周期，第一个周期比随后的周期时间长，其持续时间受修复抑制的调节。成像引导的亚细胞Cas9激活进一步促进了单个等位基因分辨率的基因组操作，
总之，vfCRISPR使DNA修复研究在空间、时间和基因组坐标上实现了高分辨率。
原始出处：
Yang Liu et al. Very fast CRISPR on demand, SCIENCE (2020). DOI: 10.1126/science.aay8204
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