微滴数字PCR在重症急性胰腺炎疑似血流感染病原学诊断中的应用

导  读

急性胰腺炎（AP）是由多种病因引起的因胰酶异常激活消化胰腺自身及周围组织而引发的急腹症，其中20%的患者会伴发器官功能障碍和（或）胰腺坏死组织感染（IPN）进展为重症急性胰腺炎（SAP），病死率高达20%～40%。SAP患者存在诸多引发血流感染（BSI）的高危因素，如侵入性操作、免疫抑制状态、局灶性感染播散、医院感染、营养状况差等，易诱发脓毒症，加重器官功能障碍，严重影响患者的预后。因此，快速、准确识别BSI病原体是指导抗菌药物使用的关键。目前，血培养（BC）是BSI诊断的金标准，但受其技术原理限制，存在阳性率低、耗时长、采血量大、易污染等缺点，难以实时辅助临床诊治。微滴数字聚合酶链反应（ddPCR）作为第三代核酸扩增与检测技术，通过平行的单分子扩增实现待检靶分子载量值的绝对定量，能同时对病原体及耐药基因进行多重检测，具有快速、高灵敏度、不依赖标准曲线等优势，以及研究和临床应用前景。

本论文基于SAP合并疑似BSI患者人群，评价ddPCR的病原学诊断效能，并探讨其临床应用价值。

微滴数字PCR在重症急性胰腺炎疑似血流感染病原学诊断中的应用

作者：王新雨¹，李刚²，毛文健¹，杨洁¹，张敬柱²，柯路^1,2，李维勤^1,2，童智慧^1,2

单位：1. 南京医科大学金陵临床医学院重症医学科；2. 南京大学医学院附属金陵医院重症医学科

摘  要

目的  探讨微滴数字聚合酶链反应（ddPCR）在重症急性胰腺炎（SAP）合并疑似血流感染（BSI）病原学诊断中的价值。

方法  选取2022年7—9月某院重症医学科收治的SAP患者，在疑似BSI发作时同步采集静脉血进行ddPCR检测和血培养（BC）及药敏试验（AST），记录两种检测方法的耗时，比较ddPCR与BC的检测结果，计算ddPCR的病原学诊断效能，并探讨ddPCR检测病原菌载量值与感染指标水平的相关性。

结果  共纳入22例患者，采集52份静脉血标本进行检测，BC阳性17份（32.7%），检出病原体29株；ddPCR阳性41份（78.8%），检测出病原体73株。ddPCR耗时低于BC［（0.16±0.03）d VS（5.92±1.20）d，P＜0.001］。在ddPCR检测范围内，以BC为金标准，ddPCR检测的灵敏度和特异度分别为80.0%、28.6%；联合检测前1周内非血标本微生物证据综合判定BSI，ddPCR检测的灵敏度和特异度分别提高至91.9%、76.9%。ddPCR耐药基因检测中，19份检出bla_KPC，9份检出bla_NDM/IMP，6份检出VanA/VanM，5份检出mecA。相关性分析显示病原菌载量值与C反应蛋白、降钙素原水平呈正相关（r分别为0.347、0.414，均P＜0.05）。

结论  ddPCR作为一种辅助BC诊断BSI的检测方法具有灵敏度高、耗时低等优势，值得进一步探讨其在临床中的应用。

引用格式　

王新雨, 李刚, 毛文健, 等. 微滴数字PCR在重症急性胰腺炎疑似血流感染病原学诊断中的应用. 中国感染控制杂志, 2024, 23(1): 9-15. DOI: 10.12138/j.issn.1671-9638.20245039. 

WANG Xin-yu, LI Gang, MAO Wen-jian, et al. Application of droplet digital PCR in etiological diagnosis of severe acute pancreatitis patients with suspected bloodstream infection. Chin J Infect Control, 2024, 23(1): 9-15. DOI: 10.12138/j.issn.1671-9638.20245039.