J Periodontol:中国学者发现: Rs2228570可以调节成龈纤维细胞和牙周膜细胞中维生素D受体的转录活性

2017-05-16 lishiting MedSci原创

Rs2228570是目前唯一已知的可以改变蛋白结构的维生素D受体(VDR)的单核苷酸多态性。VDRs可以被限制性内切核酸酶FokI切割分为3种基因型:FF, Ff和ff。这篇研究是为了探讨rs2228570对人成龈纤维细胞(hGFs)和牙周膜细胞(hPDLCs)中VDR转录活性的影响。

Rs2228570是目前唯一已知的可以改变蛋白结构的维生素D受体(VDR)的单核苷酸多态性。VDRs可以被限制性内切核酸酶FokI切割分为3种基因型:FF, Ff和ff。这篇研究是为了探讨rs2228570对人成龈纤维细胞(hGFs)和牙周膜细胞(hPDLCs)中VDR转录活性的影响。

研究提取并培养15名捐赠者的hGFs和hPDLCs,抽提其基因组DNA并通过PCR-RFLP法鉴定基因型。在成骨或非成骨诱导条件下,向细胞施加单纯骨化三醇刺激或骨化三醇与VDR拮抗剂ZK159222刺激。实时PCR检测细胞中碱性磷酸酶、骨钙素和VDR mRNA的表达变化。分别通过对硝基苯基磷酸盐底物酶活性测定法和ELISA检测碱性磷酸酶和骨钙素蛋白表达变化。

结果显示,在15组捐赠的细胞培养中,基因型FF, Ff和ff的数量分别为5, 3和7。在hGFs中,3种基因型的碱性磷酸酶和骨钙素表达未见明显差异。然而,在施加骨化三醇刺激后,FF-hPDLCs中碱性磷酸酶和骨钙素mRNA表达水平明显高于其他基因型的hPDLCs,并且骨钙素蛋白表达亦如此。此外,当施加ZK159222刺激时,骨化三醇诱导的表达上调明显减弱。另外,当细胞施加成骨诱导后,FF-hPDLCs中碱性磷酸酶和骨钙素的mRNA和蛋白水平明显高于其他基因型的hPDLCs。

结论:在hPDLCs中,FF-VDR基因型与碱性磷酸酶和骨钙素表达的显著上调密切相关。

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