高等真核生物细胞中监测自噬试验方法的解释与使用指南(上)
2016-12-29 MedSci MedSci原创
白水解通量而得到证实。这种方法的一个优点是不需要自噬抑制剂或溶酶体抑制剂来阻断LC3-II的降解。注意 在测量LC3-IIs/LC3-I时的一点重要说明即这种方法是否也适用于其它类型的细胞中还不清楚,而且在许多标准化的细胞类型中,如HeLa, HEK293和PC12,没有观察到溶解形态的LC3-II。此外,同样的顾虑适用于用western印迹的方法检测LC3-I。需要注意的
目前有关细胞自噬的研究持续性地增加,不断的吸引许多新的科学家进入这一领域。因此,在不同的生物机体中建立一套标准的监测巨自噬的准则规定,就具有重要意义。最近的很多文献已经描述了已被使用于这一目的的检测范围。有许多有用并且简便的方法可用于监测酵母巨自噬,但在其他模型系统中相对较少;此外,用于测试高等真核生物的巨自噬,存在很多混淆的但看似可接受的方法。需要强调的一个关键问题在于:在测量监测的自噬体数目与测量那些流过自噬途径的自噬体数目之间,存在一定的差异;这样一来,巨自噬堆积,将导致自噬体的聚集作用,需要从完全功能性自嗜的分化作用,其包括输送和降解,以及溶酶体(在大多数高等真核生物中)或液泡(在植物和真菌中)。本文中,我们提出一套指南,用于对这些方法的选择和解释,可供那些试图检测巨自噬及其相关进程的研究人员使用,此外,那些需要对这些研究过程的文章提供实际与合理的批评意见的审稿者也可以使用。本套指南并不意味着是一种公式化的规则,因为适当的检测方法部分地取决于那些所需要解决的问题和正在使用的系统。此外,我们强调,没有任何的检测方法能保证在各种情况下都是最恰当的,我们强烈推荐使用多种检测方式来验证
作者:MedSci
版权声明:
本网站所有注明“来源:梅斯医学”或“来源:MedSci原创”的文字、图片和音视频资料,版权均属于梅斯医学所有。非经授权,任何媒体、网站或个人不得转载,授权转载时须注明“来源:梅斯医学”。其它来源的文章系转载文章,本网所有转载文章系出于传递更多信息之目的,转载内容不代表本站立场。不希望被转载的媒体或个人可与我们联系,我们将立即进行删除处理。
在此留言
#生物细胞#
91
#真核生物#
73