ACC.26丨陕西省人民医院：从基础机制到临床实践的心血管病诊疗新进展（1）

深度解析医学证据，DeepEvidence为你支撑决策

北京时间3月28日至30日，由美国心脏病学会（ACC）举办的心血管领域盛会——ACC.26学术会议在美国新奥尔良隆重举行。陕西省人民医院研究团队带来了一系列前沿研究成果，深入揭示了动脉粥样硬化、糖尿病血管并发症等心血管核心疾病的分子免疫机制，为干预潜在新靶点提供了科学依据；同时，加速康复外科在真实世界心脏手术中的应用效果评估，为改善临床结局提供了切实可行的临床路径。这些成果展现了从实验室到床边的转化潜力，为心血管疾病的预防、治疗和管理带来了新的思路。

1. 基于CRISPR技术恢复MEX3A表达可挽救糖尿病动脉粥样硬化模型中受损的自噬功能

自噬在动脉粥样硬化中通过清除受损细胞器、防止坏死核心扩张，对维持斑块稳定性具有关键作用。糖尿病抑制自噬，从而加速斑块不稳定性。MEX3A作为一种RNA结合蛋白，已被发现参与自噬调控，但其在糖尿病动脉粥样硬化中的治疗潜力尚未被探索。本研究旨在探究CRISPR介导的MEX3A表达恢复能否挽救自噬缺陷并稳定糖尿病中的动脉粥样硬化斑块。

用链脲佐菌素诱导的ApoE敲除糖尿病小鼠，饲喂高脂饮食以构建动脉粥样硬化模型。通过腺相关病毒载体递送设计用于上调内源性MEX3A的CRISPR激活构建体。通过组织学、油红O染色和胶原定量评估斑块负荷与稳定性。通过LC3-II/I比值、p62积累及自噬体形成的电镜观察评估自噬水平。在体外，将暴露于高糖环境的骨髓源性巨噬细胞转染CRISPRa MEX3A构建体，并使用mRFP-GFP-LC3报告系统检测自噬流。

糖尿病小鼠表现为MEX3A表达抑制、自噬缺陷及坏死核心扩大的不稳定斑块。基于CRISPR的MEX3A恢复显著增强自噬流，减少p62积累，并增加自噬体形成。治疗组小鼠呈现更小的坏死核心、更厚的纤维帽及更高的胶原含量，表明斑块趋于稳定。在巨噬细胞中，CRISPRa介导的MEX3A上调恢复了高糖应激下的自噬功能，并减少了炎性细胞因子的释放。

基于CRISPR的MEX3A表达恢复能够挽救糖尿病动脉粥样硬化模型中的自噬损伤并稳定斑块。这些发现揭示了MEX3A作为潜在治疗靶点的价值，并证明了CRISPR介导的基因调控在血管疾病中的可行性。

2. 抑制NLRP3炎症小体可挽救缺陷线粒体自噬并稳定糖尿病动脉粥样硬化斑块

糖尿病可加速动脉粥样硬化并促进斑块不稳定性，部分原因在于巨噬细胞中线粒体质量控制的受损。线粒体自噬作为一种选择性自噬，对清除受损线粒体和维持细胞稳态至关重要。NLRP3炎症小体的过度活化与糖尿病血管损伤相关，但其在动脉粥样硬化中与线粒体自噬的相互作用尚不明确。本研究旨在探讨NLRP3的药理学抑制能否恢复糖尿病中缺陷的线粒体自噬并稳定动脉粥样硬化斑块。

采用链脲佐菌素诱导的ApoE敲除糖尿病小鼠，饲喂高脂饮食以建立动脉粥样硬化模型。小鼠接受选择性NLRP3抑制剂MCC950或对照溶剂处理12周。通过组织学、油红O染色、胶原及巨噬细胞浸润免疫染色评估斑块形态和稳定性。通过透射电子显微镜、LC3-II/I比值、PINK1/Parkin信号通路和线粒体DNA释放评估线粒体自噬水平。在体外，将骨髓源性巨噬细胞暴露于高糖环境，并在有或无MCC950条件下，通过线粒体转换实验和线粒体自噬报告基因构建体检测线粒体自噬活性。

糖尿病小鼠动脉粥样硬化斑块中出现大范围坏死核心、薄纤维帽及受损的线粒体自噬。NLRP3抑制减少了IL-1β分泌，恢复了PINK1/Parkin介导的线粒体自噬，并减少了功能失调线粒体的积累。治疗组小鼠表现出更小的坏死核心、更高的胶原含量及改善的斑块稳定性。在体外实验中，MCC950挽救了高糖诱导的线粒体自噬抑制，并降低了巨噬细胞的炎症活化。

NLRP3炎症小体的过度活化损害线粒体自噬，并促进糖尿病动脉粥样硬化中的斑块不稳定性。NLRP3的药理学抑制可恢复线粒体自噬并促进斑块稳定，这为糖尿病血管并发症的潜在治疗策略提供了机制性见解。

3. 全身性炎症调节尿液中多环芳烃代谢物与高血压成人之间的关联

本研究旨在探讨全身性炎症在普通美国人群中多环芳烃（PAHs）尿代谢物与高血压之间关联中的中介效应。

这项横断面研究分析了2003-2012年美国国家健康与营养调查（NHANES）中的9种尿多环芳烃代谢物。应用分位数g计算法评估多环芳烃混合暴露与高血压患病率之间的关联。采用中介效应分析探讨多环芳烃（暴露因素）、高血压（结局）及炎症标志物（C反应蛋白、碱性磷酸酶、白细胞计数、中性粒细胞计数和单核细胞计数；中介变量）之间的关联。

在6846例参与者中，2473例（36.1%）被诊断为高血压。高血压组的平均收缩压和舒张压分别为138.6（20.4）mmHg和72.7（16.0）mmHg，非高血压组分别为115.8（10.9）mmHg和69.0（10.0）mmHg。尿多环芳烃代谢物混合暴露与高血压患病率增加显著相关，每增加一个分位数，其β值为0.124（95%CI 0.04-0.20）。其中，1-羟基菲（1-PHE）（36.48%）、2-羟基芴（2-FLU）（27.64%）和1-羟基芘（1-PYR）（26.64%）对总体效应的正向贡献最大。中介效应分析显示，炎症标志物在多环芳烃代谢物（2-FLU、3-PHE、1-PHE、2-PHE、1-PYR和9-FLU）与成年高血压患者的关联中起中介作用。

研究表明，多环芳烃混合暴露与美国成年人群高血压患病率相关，其中1-PHE、2-FLU和1-PYR可能是主要驱动因素。此外，我们观察到全身性炎症在这一关联中起显著的中介作用。

4. 护士主导的加速康复路径在心脏外科中的真实世界效果：与更少并发症和更低资源消耗相关

加速康复外科（ERAS）方案在心脏手术中的采纳程度不一。由麻醉护士主导的ERAS实施对心血管结局的真实世界影响仍不明确。

研究人员在12个中心开展了一项前瞻性注册研究，针对择期心脏瓣膜或冠状动脉旁路移植手术患者实施护士主导的ERAS组合方案。其核心要素包括多模式镇痛、计划性早期拔管（≤6小时）、限制性输血阈值、目标血糖控制及术后第1天活动。根据ERAS依从性（≥80% vs <80%）对患者进行分层。主要终点为30天主要不良心血管事件（MACE）。次要终点包括新发心房颤动、谵妄、机械通气时长、重症监护室和住院时长、阿片类药物用量、输血率、费用及30天再入院率。采用倾向评分加权平衡基线协变量；敏感性分析包括符合方案集分析和伪终点检验。

在1420例患者中（其中612例依从性≥80%），加权后基线特征均衡。高依从性与较低的MACE发生率相关（9.7% vs. 14.2%；校正后风险比[HR] 0.68，95%置信区间[CI] 0.52-0.89；P=0.004；绝对风险差异−4.5%）。新发心房颤动（21% vs. 15%；HR 0.71；P=0.006）和谵妄（13% vs. 9%；HR 0.66；P=0.01）发生率降低。机械通气时长（中位数11.8 vs. 7.3小时；P<0.001）、ICU住院时间（2.6 vs. 3.9天；P<0.001）和阿片类药物用量（减少28%）下降；输血率降低（31% vs. 22%；P=0.002），费用减少（−11%）。再入院率下降（12% vs. 8%；HR 0.64；P=0.02）。在瓣膜手术和冠状动脉旁路移植术队列中效果一致，并存在剂量-反应关系：依从性每提高10%，MACE相对风险降低7%（趋势P=0.01）。安全性结局（再插管、肾损伤）无变化。

在真实世界心脏手术中，麻醉护士主导的ERAS高依从性与较少的心血管并发症、更短的机械通气及ICU住院时间、更低的阿片类药物使用量和医疗费用独立相关。护士在围手术期路径中的主导作用为规模化改善临床结局提供了切实可行的途径。

5. MEX3A缺乏放大铁死亡并加速糖尿病动脉粥样硬化中的坏死核心扩展

巨噬细胞自噬对糖尿病动脉粥样硬化中的斑块稳定性至关重要。新近证据表明，以脂质过氧化为特征的铁死亡，一种铁依赖性细胞死亡形式，可促进坏死核心形成。MEX3A是一种具有转录后调控功能的RNA结合蛋白，已知参与自噬调控，但其在铁死亡和斑块易损性中的作用尚不清楚。

将ApoE^-/-糖尿病小鼠与MEX3A杂合敲除小鼠杂交，并饲喂高脂饮食以构建实验性动脉粥样硬化模型。通过油红O染色和马松三色染色评估斑块形态及坏死核心大小。通过丙二醛水平、脂质活性氧探针及线粒体萎缩的透射电镜观察评估铁死亡。采用蛋白质印迹和免疫组化检测GPX4、ACSL4和SLC7A11的表达。在体外，将骨髓源性巨噬细胞置于高糖条件下，并分别给予或不给予铁死亡抑制剂Ferrostatin-1处理。

在糖尿病ApoE^-/-小鼠中，MEX3A缺失显著增加了坏死核心面积并导致斑块不稳定。MEX3A缺陷的巨噬细胞表现出脂质活性氧积累增加、丙二醛水平升高及典型的铁死亡相关线粒体改变。GPX4和SLC7A11表达下调，而ACSL4表达上调。使用Ferrostatin-1处理显著降低了脂质过氧化并恢复了斑块稳定性，表明MEX3A缺失、铁死亡与斑块易损性之间存在因果关系。

MEX3A缺失通过加剧巨噬细胞铁死亡和促进坏死核心扩展，加速了糖尿病动脉粥样硬化的进展。靶向铁死亡通路可能成为稳定糖尿病易损斑块的新策略。

6. 氧化低密度脂蛋白触发血管平滑肌细胞发生细胞焦亡，而红景天苷治疗可减轻该通路以改善斑块稳定性

细胞焦亡是一种程序性炎症性细胞死亡形式，已被证明是导致动脉粥样硬化斑块不稳定的关键因素。血管平滑肌细胞对维持斑块完整性至关重要，但其在糖尿病和高脂血症条件下对细胞焦亡的易感性仍不清楚。氧化低密度脂蛋白是动脉粥样硬化的关键致病因子，但其诱导血管平滑肌细胞焦亡的作用尚未完全阐明。红景天苷作为一种具有抗氧化和抗炎特性的天然化合物，可能通过调控该通路发挥保护作用。

将原代人主动脉血管平滑肌细胞暴露于氧化低密度脂蛋白，并分别给予或不给予红景天苷处理。通过乳酸脱氢酶释放、caspase-1活化和gasdermin D裂解评估细胞焦亡水平。采用蛋白质印迹和酶联免疫吸附法检测NLRP3炎症小体组分表达及IL-1β分泌。在高脂饮食喂养的ApoE敲除小鼠中，分别给予氧化低密度脂蛋白或氧化低密度脂蛋白联合红景天苷处理，观察斑块形态。通过组织学和免疫染色定量分析纤维帽厚度、坏死核心面积和胶原含量。

氧化低密度脂蛋白显著诱导血管平滑肌细胞焦亡，表现为caspase-1活化增强、gasdermin D裂解增加及IL-1β释放增多。这些变化伴随收缩标志物表达降低，并在体内实验中表现为纤维帽变薄、坏死核心扩大的斑块不稳定性增强。红景天苷处理可降低NLRP3炎症小体活化、减轻细胞焦亡性死亡，并维持血管平滑肌细胞的收缩表型。在糖尿病ApoE敲除小鼠中，与未处理对照组相比，红景天苷给药可减小坏死核心面积、增加胶原沉积，并改善斑块稳定性。

氧化低密度脂蛋白通过激活NLRP3炎症小体引发血管平滑肌细胞焦亡，进而导致斑块失稳。红景天苷可有效抑制该通路，维持血管平滑肌细胞功能并增强斑块稳定性。