Virol J：症状出现6个月后高滴度的中和SARS-CoV-2抗体与新冠肺炎住院患者病情加重相关

背景：2019年冠状病毒病(新冠肺炎)是由非典型肺炎冠状病毒2型(β-CoV-2)引起的一种呼吸系统疾病，是此次大流行的原因。体液免疫对于对抗和预防SARS-CoV-2感染至关重要。因此，随着时间的推移，了解影响体液保护的临床因素对于了解SARS-CoV-2引起的疾病至关重要。

针对SARS-CoV-2刺突蛋白受体结合域(RBD)的抗体对于发展免疫保护至关重要。几个因素可能会影响对SARS-CoV-2感染和疫苗接种的体液反应，包括年龄、男性和免疫抑制。然而，疾病严重程度如何影响体液反应，如中和抗体(NAB)的产生，还没有完全了解。使用不同的实验室化验方法，NAB滴度与疾病严重程度之间的正相关性已经被很好地描述了长达90天的症状出现后。然而，目前尚缺乏症状出现后90天以上疾病严重程度对NAB滴度的影响。一项广泛的综述得出结论，病毒载量和疾病严重性之间的联系是不一致的。因此，评估病毒脱落和影响病毒脱落的临床特征对于正确识别和隔离感染患者以及进一步评估病毒载量、疾病严重程度和体液反应之间随时间的不一致关系是至关重要的。

目的：我们进行了一项前瞻性队列研究，以评估新冠肺炎住院患者的体液反应和活体病毒脱落。此外，我们探讨了临床特征，如疾病的严重性，是否会在纳入研究后影响NAB滴度长达180天和病毒脱落长达30天。

材料与方法：对47例新冠肺炎住院患者进行前瞻性单中心观察队列研究。在纳入的最初30天中，在8个时间点收集口咽拭子。分别在症状出现后7天(IQR5-10)、37天(IQR35-38)、97天(IQR95-100)和187天(IQR185-190)后采集血清样本。用室内活病毒微量中和试验测定NAB滴度。在Vero E6细胞中进行病毒培养。

结果：与病情严重程度低的患者相比，病情严重程度高的患者在发病后第37天(1.58，95%CI[0.34~2.81])、97天(2.07，95%CI[0.53~3.62])和187天(2.49，95%CI[0.20~4.78])的平均log2 NAB滴度较高。病毒载量峰值(0.072，95%CI[−0.627-0.728])以log10SARS-CoV-2拷贝/ml表示，与疾病严重程度无关。在入院后不久收集的几乎所有(60/61)口咽部样本中，病毒培养尝试均未成功。

图1 描述分析样本总数和分析结果的条形图。分析了若干份总抗体酶联免疫吸附试验样品。B分析的RT-PCR样本数。C经分析的病毒培养样本数目

图2 描述入院后第0、30、90和180天中和抗体(NAB)滴度水平的盒子图。入院时出现症状的平均天数为7天，并被添加到数字中的采样时间点，以描述与症状出现有关的NAB滴度。所有滴度均以log2标度表示。描述在每个采样时间点进行的所有测量的log2 NAB滴度的框图。蓝点表示疾病严重程度较高的患者的测量结果，而红点表示疾病严重程度较低的患者的测量结果。疫苗诱导的第187天的NAB滴度反应与症状出现后第37天未接种疫苗的自然感染后的NAB滴度反应的比较。蓝色方框图表示已接种疫苗的患者的测量值，而红色方框图表示未接种疫苗的患者的测量值。病情严重程度高的患者用三角形标记，而病情严重程度低的患者用圆点标记。采用Mann-Whitney U检验检验零假设。*=P<0.001，**=P<0.01，*=P<0.05，NS不显著

图3 用连续中和抗体(NAB)测量的意大利面图和相应的线性混合效应(LME)模型预测。使用入院后0、30、90和180天预定采样时间点的NAB滴度测量。入院时出现症状的平均天数为7天，并被添加到数字中的采样时间点，以描述与症状出现有关的NAB滴度。所有滴度均以log2标度表示。显示预定义采样时间点的所有连续NAB滴度测量的意大利面曲线图。来自相同患者的样本用连接的黑线标记。点和三角形表示在特定时间点的NAB测量。在样本采集之前接种疫苗用蓝色标记，而来自未接种疫苗患者的样本用红色标记。病情严重程度高的患者用三角形标记，而病情严重程度低的患者用圆点标记。B LME模型预测，模型预测按疾病严重程度分层。第187天接种疫苗患者的样本被排除在模型之外。标准误差被绘制为误差条。

结论：我们发现在症状出现后的第37、97和187天，病情严重程度与平均NAB滴度之间存在相关性。然而，入院期间的病毒载量峰值与疾病严重程度无关。

原文出处：Sejdic A,  Frische A,  Jørgensen CS,et al.High titers of neutralizing SARS-CoV-2 antibodies six months after symptom onset are associated with increased severity in COVID-19 hospitalized patients.Virol J 2023 Jan 25;20(1)